由于朊病毒的特殊性,周文做實驗時格外小心。
生物口罩、生物手套、生化防護服,武裝齊全。
而秦海濤他們四個人,只是幫忙打下手,沒有直接接觸裝有病毒的器皿。
檢測朊病毒,目前一共有四種方法。
1,電鏡法。
2,毛細管SDS-凝膠電泳法。
3,熒光標記肽鏈的毛細管電泳免疫測定法。
4,雙色強熒光目標掃描法。
其中第二種“凝膠電泳法”是最好、最直接的檢測方法。
主要是通過理化方法--差速、超速離心,sodium N-lauroylsarcosine(月桂酰肌氨酸)、PK處理,提純PrPsc。
然后在“毛細管電泳儀”上進行毛細管SDS-凝膠電泳。
根據各組分通過檢測器時,在214 nm波長處產生吸收峰的時間和峰形,鑒別出朊病毒病原因子PrPsc。
這個方法標本用量少,而且不需要免疫學試劑,判斷很直觀。
缺點是需要用到“超速離心機”以及“專用毛細管電泳儀”這兩樣設備。
超速離心機,目前基本上都是采購的國外品牌,售價高達50萬RMB起。
而朊病毒專用毛細管電泳儀也非常昂貴,需要二十多萬RMB。
價格昂貴就算了,關鍵用到的機會少啊。
一般醫院連采購設備的錢都賺不回來,也只有像江州醫院這樣有錢的三甲醫院才會采購。
正因為如此,大城市的醫療資源才稀缺。
小城市得了個怪病,你連檢測都做不了。
周文按照理化方法,一步步小心翼翼的制備試劑、提取稀釋液、放到超速離心機上分離變異朊病毒蛋白。
剛剛升級的生物免疫學,讓他更加的得心應手。
在這個過程中,周文也在教導秦海濤以及董文穎幾個人,告訴他們常規朊病毒理化試驗過程中需要注意的地方。
“添加月桂酰的時候,你們一定要記住……”
這些經驗,別說大學教授了,就算是國內那些朊病毒研究所的專家也講不清楚。
因為國內在病毒、尤其是朊病毒研究方面,基本上還處于初級階段,這些實用經驗,只有國外那些頂尖研究所才能掌握。
比如英國肯特大學酵母朊病毒研究所。
長久以來,朊病毒蛋白領域的新發現,幾乎都被幾個酵母領域的研究團隊“壟斷”。
那些頂尖研究所,是不會輕易把技術教授給你的。
除非你能拿到他們的offer。
而秦海濤他們顯然還沒有意識到自己是有多么的幸運,只是覺得周文的講解非常的淺顯易懂,甚至連動作要領都一并告訴了他們。
在周文說的時候,秦海濤和董文穎兩個人都是聚精會神的聽著。
至于另外兩個老實驗員,雖然表面上在聽,實際上根本沒有聽進去。
因為他們覺得,以周文的方法根本不可能提取到朊病毒,這樣的教學根本就是在紙上談兵。
周文又沒有“電眼”,他怎么可能知道這些具體的實驗變量呢,一切不過都是他的猜測而已。
等提純好PrPsc后,周文把含有朊病毒的清液注入到貝克曼P/ACE 5 500上,進行電泳實驗。
“好了~”注入完畢后,周文松了口氣。
“秦海濤你留下來照看機器,其他人洗手吃飯吧。”
大家聞言,紛紛去洗手池洗手……
吃過飯后,周文哪也沒敢去,直接回了實驗室。
常規提取法獲得的樣本太稀少了,不親自看著實在不放心……
晚上七點半,電泳實驗結束。
其中一名實驗員黃興中,拿著電泳分析單隨意的看了眼,潛意識認為,這次的實驗還會跟之前一樣失敗。
然而下一秒,他臉上就露出了驚訝的神色,“咦,你們快來看,好像檢測到朊病毒了……”
其余幾個人聞言,紛紛圍了過來。
“咦,還真是噯。”
“老師你快來看,我們檢測到朊病毒了。”
“嘶嘶……不應該啊,這怎么可能呢,是不是搞錯了……”
周文接過分析單仔細看了看,很快臉上露出了抑制不住的喜色。
不管之前的實驗做的有多么順利,在結果出來之前,沒有什么事情是百分之百的。
比如,毛細管電泳儀出現故障,同樣也會導致檢測失敗。
這將使得之前所有的努力全部白費。
所以有時候做實驗,運氣也占了一部分因素。
等確定不是眼花后,大家臉上都露出了難以言喻的激動神色。
說實話,包括秦海濤以及董文穎在內,都不認為常規方法下能提取到朊病毒蛋白。
在不抱有希望的前提下,靠著常規采集方法提取到朊病毒蛋白,真得是一件特別自豪的事情。
等興奮過后,秦海濤立刻通知楊立群以及張曙光。
兩個人聞言后,立刻趕了過來。
“根據檢測顯示,這是聚集體朊病毒……”
楊立群和張曙光,看著明明白白的電泳分析單,臉上充滿了驚訝、喜悅、興奮、激動以及難以置信的神色。
“這真是尿液里面檢測到的?”
“是得張組!樣本是我和周文一起采集的。”
聽到董文穎的話,楊立群和張曙光一臉的不可思議。
常規檢測和非常規檢測的情況下,提取到朊病毒,意義完全不同。
這是一個非常重要的發現,具有很高的研究價值。
“你們都是好樣的。雖然這只是朊病毒研究的一小步,但卻是咱們中國在朊病毒領域的一大步。”
“謝謝楊組夸獎。主要還是周老師的原因,要不是他一直在堅持的話,我們可能一看就放棄了。”
楊立群和張曙光看向周文。
他們兩人一直都非常看好這個年輕人,而周文也不負所望,其在生物醫學方面,展現出了非常強大的天賦。
而且還經常帶給他們一些驚喜。
比如這次。
昨天他們還預言說,絕對不可能在常規采集方法下,提取到朊病毒蛋白。
結果周文隔天就“打臉”。
不過這個臉打的舒服。
如果可以的話,他們希望他繼續打臉,最好左右開弓!
激動之后,楊立群和張曙光兩人到電腦上分析研究樣本采集記錄,希望從中找出一定的規律來。
周文對楊立群和張曙光的行為,也是非常的敬佩。
這才是科學研究該有的精神呢。
雖然誰都不希望在常規狀態下采集到朊病毒蛋白,但是不能因為不希望而不去研究。
只有知道哪些因素會導致朊病毒蛋白通過體液排泄,才可以更好的進行預防控制。
第二天早上,楊立群把周文的發現,上報到了醫院,請求正式成立檢測中心下屬的“朊病毒研究小組”。
醫院領導,為此召開了專門會議,研究討論要不要批準成立這個研究小組?
作為背靠江州大學的附屬第一人民醫院,無論是硬件設備還是人才儲備,其實都不算太差,但為什么就是比不過其他醫院呢?
究其原因,主要是江州一院樣樣通、樣樣松,沒有一樣拿得出手的“絕活”。
比如省內的金陵軍總醫院,在腎病方面,全國都是赫赫有名的。
比如中海的華山醫院,在皮膚科、感染科、神經科則非常牛逼。
再比如京都大學第一醫院,在泌尿外科強無敵。
還有長征醫院的骨科……
至于四大天團,北協和、南湘雅、東齊魯、西華西,那是神仙級別,江州醫院拍馬都趕不上。
總之,江州醫院在省內還能跟除了金陵以外的其他市立醫院比比,放到國內來說,根本不值一提。
正因為如此,江州醫院急需要一樣拿得出手的醫技“鎮場子”。
最后,研究小組申請獲得了全票通過。
由于江州市……應該說整個蘇東省,根本沒有朊病毒方面的權威專家。
而作為該病毒研究的發起人楊立群、張曙光以及周文,無疑成為了研究小組的骨干人選。
在楊立群和張曙光的推選下,周文成為了檢測中心朊病毒研究小組組長,他們兩個是名譽副組長。
第一批小組成員:秦海濤、董文穎、黃興中、劉 杉……
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